生化及生化检验

第一章  蛋白质的结构与功能                     

掌握蛋白质的各级结构及其相应化学键。

掌握蛋白质的理化性质。

第二章  核酸的结构与功能                      

    1. 掌握核酸的基本组成单位及其连接方式。

    2. 掌握DNA与RNA组成的区别。

    3. 掌握DNA与RNA的结构与理化性质。

    4. 熟悉DNA及RNA的功能。

    5. 了解DNA变性。

第三章  酶                                 

1. 掌握酶的催化作用特点。

    2. 掌握酶的分子结构，酶的必需基团，酶的活性中心。

    3. 掌握同工酶。

    4. 掌握影响酶促反应速度的因素，酶的竞争性抑制作用。

第四章   糖代谢                            

    1. 掌握糖的无氧酵解，有氧氧化，限速酶及其催化的反应。

    2. 掌握磷酸戊糖途径的生理意义。

第五章  脂类代谢                              

    1. 掌握脂肪的动员，脂肪酸的β－氧化。

    2. 掌握血浆脂蛋白分类。

第六章   生物氧化                           

    1. 掌握生物氧化概念。

    2. 掌握三羧酸循环的基本途径，生理意义。

    3. 掌握ATP生成方式。

第七章  氨基酸代谢                         

    1.掌握氨基酸的一般代谢。

    2. 掌握氨的代谢，氨的转运，一碳单位代谢。

第八章    DNA的生物合成（复制）                    

    1. 掌握DNA的半保留复制，生物学的中心法则。

    2. 熟悉DNA的复制过程。

第九章    RNA的生物合成（转录）          

    1. 掌握复制与转录的区别。

    2. 熟悉转录的过程及真核生物mRNA转录后的修饰与加工。

第十章    蛋白质的生物合成（翻译）       

掌握参与蛋白质生物合成的物质。

熟悉翻译的大致过程。

生化检验

第一章   生物化学检验的标本

      1. 了解生化检验的常用标本

第二章   常用生物化学检验技术

掌握分光光度法的基本原理及操作方法。

掌握火焰光度法的临床应用。

掌握电泳、电泳技术的分类，影响电泳速度的因素。

      4. 掌握层析的概念与分类。

第三章   分子生物学技术

掌握DNA的分离与纯化。

掌握重组DNA技术。

掌握聚合酶链反应（PCR）的定义及基本步骤。

了解分子杂交中探针种类，分子杂交种类。

第四章   酶类分析技术

掌握酶促反应底物动力学。

了解酶活性测定在临床上的应用。

第五章   钠、钾、氯和酸碱平衡检验

掌握钠、钾、氯测量方法。

掌握血气分析测量方法。

第六章   钙、磷、镁和微量元素测定

      1. 掌握血清钙测定的方法。

第七章   肝功能检验

      1. 掌握氨基转移酶测定的方法。

第八章   肾脏功能检验

掌握蛋白尿的选择指数。

掌握肾小球损伤的敏感指标。

第九章   心脏标志物检验

1. 掌握酶类标志物和蛋白类标志物中最具有临床诊断意义的指标。

2. 掌握急性心梗后心肌酶的时相变化。

      3. 掌握早期标志物。

第十章   肿瘤标志物检验

掌握肿瘤标志物的概念。

了解肝癌的诊断与鉴别诊断。

第十一章   治疗药物监测

掌握治疗药物监测的概念。

微生物学及微生物学检验

绪论

掌握微生物的概念与分类，微生物的特点。

熟悉微生物与人类的关系。微生物学及微生物学检验在医学上的地位与任务。

第一篇   细菌学总论

第一章   细菌的形态与结构

1、掌握细菌的基本形态，细胞壁的功能、化学组成、革兰阳性菌与革兰阴性菌区别，L型细菌；质粒的意义，胞浆内含物；细菌的特殊结构、功能、意义。

2、熟悉细菌的基本结构

细菌的生理

1、掌握细菌生长繁殖的条件、方式和速度，需氧菌、厌氧菌，兼性厌氧菌的特点；细菌的合成代谢产物及意义。细菌的分解代谢。

2、熟悉细菌的新陈代谢。

细菌的营养类型。

第三章   细菌的分布菌

掌握正常菌群、菌群失调、生态失调等基本概念。

熟悉细菌在人体的分布、菌群失调的诱因、常见菌类。

了解细菌在自然界的分布。

第四章   外界因素对细菌的影响

1、掌握消毒、灭菌、无菌、防腐、抑菌等基本概念。生物因素对细菌的影响。噬菌体的定义、生物学性状、噬菌体与宿主菌的相互关系。细菌素。

熟悉用物理和化学消毒灭菌的种类及应用。常用消毒剂的杀菌机理。

了解影响消毒灭菌效果的因素

第五章   细菌的遗传与变异

掌握细菌遗传变异的物质基础（染色体、质粒、转位因子）。

熟悉细菌变异的机理。基因的转移与重组（转化、转导、接合、溶原性转换、原生质体融合）。

了解细菌变异的现象、细菌遗传变异的实际应用。

第六章   细菌的感染与免疫

掌握感染、细菌的致病性、菌血症、败血症、毒血症、脓毒血症、带菌状态等基本概念；细菌的致病物质基础。医院感染监测。

熟悉内外毒素的区别。医院感染的概念、流行病学监测的微生物学检验和质控；医院感染的重点科室及诊断标准、控制。

了解机体的抗菌免疫。

第七章  细菌的分类与命名

1、掌握细菌的分类单位、分类系统和命名。

2、熟悉细菌的分类方法。

  细菌检验的基本技术

第八章   细菌形态学检查

掌握常用显微镜的种类、原理、使用。细菌的染色法（不染色标本的检查、染色标本的检查）革兰氏染色法、抗酸染色法的方法、结果、原理、意义。

2、染料的组成、种类。细菌染色的一般程序

第九章   细菌的培养与分离技术

掌握培养基的定义、制备、种类。

熟悉细菌的人工培养技术。细菌的生长现象

了解培养基的成分。

第十章   细菌的生物化学实验

掌握常见菌属鉴定常用的生化实验的原理、结果、意义。

熟悉鉴定细菌用的药物敏感实验。

第十一章   血清学实验

熟悉血清学鉴定与血清学诊断的主要类型。

第十二章   动物实验

掌握动物采血法。

熟悉常见细菌性疾病动物接种的鉴别诊断；动物接种途径和方法。

了解实验动物的分类与选择。

第十三章   菌种保存与管理

熟悉菌种的保存的目的、方法。

了解菌种的管理、分类。

第十四章   细菌检验的自动化、微型设备和新技术

熟悉微生物数码分类鉴定系统。

了解自动化细菌鉴定系统、自动血液培养检测和分析系统。

第十四章   细菌对抗菌药物敏感实验

掌握需氧菌及兼性厌氧菌的药物敏感实验

熟悉结核药物敏感实验

了解厌氧菌的药物敏感实验、真菌的药物敏感实验

第十五章   临床细菌学检验的质量控制及实验室安全防护

掌握室内质量控制。

熟悉室内质量评价；实验室安全防护。

第十六章   病原性球菌、肠道杆菌及检验

掌握病原性球菌检验、沙门氏菌属、志贺氏菌属、埃希氏菌属的检验。

熟悉病原性球菌、沙门氏菌属、志贺氏菌属、埃希氏菌属的生物学性状。

了解肠道其它细菌的检验。

第十七章   弧菌属、弯曲菌属、革兰氏阴性杆菌及检测

掌握弧菌属、弯曲菌属、革兰氏阴性杆菌及检测。

熟悉弧菌属、弯曲菌属、革兰氏阴性杆菌的生物学性状。

了解其它细菌的检测。

第十八章   需氧革兰氏阳性杆菌、分枝菌属、厌氧菌及检验

掌握结核杆菌、白喉杆菌、厌氧性细菌的检验

2、熟悉需氧革兰氏阳性杆菌、分枝菌属、厌氧菌其它细菌及检验

3、了解需氧革兰氏阳性杆菌、分枝菌属、厌氧菌的生物学性状

第十九章   支原体、衣原体、螺旋体、立克次体及检验

1、熟悉支原体、衣原体、螺旋体、立克次体及检验

了解支原体、衣原体、螺旋体、立克次体的生物学性状

第二十章   真菌学及检验

掌握病原性真菌及检验。

熟悉真菌的生物学性状。

第二十一章   病毒的基本性状、病毒的感染与免疫、实验室诊断

掌握病毒的实验室的诊断。

熟悉病毒的基本性状。

了解病毒的感染与免疫。

第二十二章   呼吸道病毒、肠道病毒及检验

掌握流感病毒、脊髓灰质炎病毒的检验

熟悉呼吸道、肠道其它病毒的检验。

了解呼吸道、肠道病毒的生物学性状。

第二十三章   肝炎病毒、逆转录病毒、其它病毒及检验

掌握甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒的检验。

熟悉其它肝炎病毒、逆转录病毒的检验。

了解肝炎病毒、逆转录病毒、其它病毒的生物学性状。

第二十四章   临床常见标本的细菌学检查

1、掌握临床常见标本的细菌学检查的基本要求

2、熟悉血液、尿液、粪便、脓汁的细菌学检查

3、了解其它标本的细菌学检查原则。

免疫学检验

绪论

1．[掌握]免疫概念

2．[理解]免疫的生理功能

第一章   抗原

[掌握]  抗原的概念，特性，医学上重要的抗原

[熟悉]  决定免疫原性的因素、抗原决定簇/表位

[了解]  抗原分类，TD-抗原，超抗原、异嗜性抗原

第二章  免疫球蛋白与抗体

[掌握]  免疫球蛋白和抗体的概念，基本结构，功能，种类

[熟悉]  免疫球蛋白的分类，血清型，水解片段

第三章 补体系统

[掌握]  补体的概念，激活途径，生物学活性/作用。

[熟悉]  补体激活的途径

免疫系统

[掌握]  免疫系统的组成，细胞因子，白细胞分化抗原

[熟悉]  ADCC，免疫活性细胞，单核巨噬细胞

主要组织相容性复合体

[掌握]  MHC的概念，HLA-I类分子与HLA-II类分子的分布，功能

[熟悉]  MHC的结构

免疫应答

[掌握]  免疫应答的概念，抗体产生的一般规律

[熟悉]  免疫应答的基本过程，体液免疫，细胞免疫的特点

第七章  抗原与抗体反应

1．掌握亲和性的定义，血清学反应；抗原与抗体反应的特点；

2．熟悉抗原与抗体反应的原理、类型；影响抗原与抗体反应的因素；

第八章  特异性抗体的制备技术

1．掌握免疫原的制备方法；IgG纯化及鉴定方式

2．熟悉免疫原的种类，免疫血清的分离及保存，细胞破碎的常用方法，动物采血法；单克隆抗体制备技术

3．了解蛋白质的提纯；佐剂的条件  

第九章  凝集反应

1．掌握凝集反应的定义及条件

2．熟悉间接凝集反应的类型

3．了解凝集反应的临床意义  

第十章  沉淀反应

1．掌握沉淀反应的定义，

2．熟悉 Mancini 曲线及 Fehcy曲线

第十一章  补体结合试验和补体测定技术

1．掌握补体活性测定的原理；

2．熟悉CH50测定的原理和临床意义，C3、C4测定的临床意义

第十二章 酶免疫技术

1．掌握酶免疫技术的特点、分类；ELISA的基本原理，

2．熟悉常用的酶及其底物，双抗夹心法，生物素与亲和素（BAS）-酶联免疫吸附试验原理

3．了解沟状效应、 免疫印迹法

第十三章  荧光免疫技术

1．掌握荧光免疫显微技术基本原理，技术类型及临床应用

2．熟悉均相荧光免疫测定的原理；流式荧光免疫技术的基本原理和应用意义

3．了解荧光标记物的制备，  

第十四章  放射免疫技术

1．掌握RIA原理、优点及缺点

2．熟悉RIA适用范围，IRMA的定义

第十五章 金免疫技术

1．掌握金免疫技术的的主要类型

2．熟悉金免疫测定技术的原理和临床应用  

第十六章  化学发光免疫技术

1．掌握化学发光技术的优点和分类

2．熟悉发光酶免疫测定

3．了解化学发光技术的临床应用

第十八章  免疫细胞检测技术

1．掌握分离和纯化外周血单个有核细胞技术；

2．熟悉T淋巴细胞数量及功能检测

3．了解花环技术的临床意义

第十九章 人类白细胞抗原分型检测技术

1．掌握SD抗原包含的类型

2．熟悉   HLA血清学分型法的技术要点

3．了解HLA血清学分型法的临床意义

第二十章  细胞因子及其受体检测技术

1．掌握选择细胞因子检测法的条件，

2．熟悉细胞因子的生物学检测法的适用对象

3．了解细胞因子受体检测常用的方法

第二十二章  免疫学检验的质量控制

1．掌握免疫学检验的质量控制的重要性；EQA的意义

2．熟悉   EQA与PT的区别

3．了解出现曲线漂移的条件

第二十六章  自身免疫病及检验

1．掌握ANA核型与相关疾病

2．熟悉抗核抗体的测定方法与临床意义

3．了解测定抗ENA抗体的测定方法与临床意义

技能部分

生物化学检验实验操作考试办法

一、考试项目（按生物化学实验指导方法选以下其中一项）

    １、血清蛋白含量的测定（含分光光度法、电泳法及层析法）

    ２、血清胆固醇和甘油三酯的测定（异丙醇抽提法）

    ３、血糖定量（邻甲苯胺法）

二、实验要求（按生物化学实验指导方法，学生独立操作，90分钟内完成）

    １、目的方法

    ２、仪器材料

    ３、结果结论

    ４、注意事项

三、操作技能

    １、基本操作

        玻璃仪器的洗涤

        (1) 洗涤方法：A、一般洗涤剂  B、铬酸洗液

        (2) 洗涤标准：A、内壁不挂水珠 B、外壁无字迹无标签 C、蒸馏水冲三遍

        吸量管的选择和使用

        (1) 奥氏吸管 (2)移液管 (3)刻度吸管

        混匀法

        (1) 旋转 (2)搅拌 (3)弹打

    ２、比色法－721分光光度计使用

        (1) 波长的选择 (2)透光度"0"和"100"调定 (3)样品测定 (4)准确读取光密度 (5)仪器维护

    ３、电泳法－聚丙酰胺凝胶电泳

        (1) 制胶 (2)上样 (3)电泳 (4)剥胶 (5)染色 (6)漂洗

    ４、层析法－微量离子交换法

        (1) 装柱 (2)上样 (3)洗脱 (4)收集 (5)定量 

    ５、离心法－普通离心机使用

        (1) 严格平衡 (2)严格对称 (3)慢启慢停 (4)注意安全和离心异常声音

四、评分标准

    １、基本操作10分

    ２、仪器使用10分

    ３、实验报告15分（含实验方法与结果）

        其中实验结果按相对误差计分

        测定值误差<=5％者为满分

        测定值误差在>5％－15％者扣5分

        测定值误差在>15％者扣8分

五、随机提问

    教师对实验原理、现象、步骤及注意事项等随机进行提问

微生物学检验实验操作考试内容

微生物技能

一、考试项目

 1．细菌涂片标本的制备

 2．革兰氏染色法

 3．显微镜油浸镜的使用方法

 4．细菌分离培养技术（平板、斜面、液体）

二、实验操作要求

 1．目的

 2．材料

 3．方法

 4．注意事项

三、操作步骤的具体要求及评分点

⑴细菌涂片标本的制备

①载玻片的准备

②涂菌

③干燥

④固定

⑵革兰氏染色法

①结晶紫初染

②碘液媒染

③酒精脱色

④复染

⑶显微镜油浸镜的使用方法

①镜体垂直，不使载物台倾斜

②识别油镜头（一道蓝圈；100*；Del）

③取得最大亮度（集光器升到最高点，光圈开大，转动反光镜）

④观察物象（加油，调焦点）

⑤清洁保养（擦拭镜油，下降集光器，归位）

⑷细菌分离培养技术

①平板划线法（连续划线法、分段划线法）

②斜面培养基接种法

③液体培养基接种法

免疫学检验实验操作考试内容

一、考试项目

 1．玻片凝集

 2．试管凝集

 3．间接凝集抑制试验

 4．ELISA

二、实验操作要求

1．目的

 2．材料

 3．方法

 4．注意事项

三、操作步骤的具体要求及评分点

⑴玻片凝集

①准备玻片分三格，于第一格和第二格各加一滴伤寒杆菌诊断血清，第三格加一滴生理盐水

②用灭菌接种环取伤寒杆菌培养物少许，涂于第三格内再涂于第一格内分别搅拌均匀成乳液状

③同法取痢疾杆菌培养物少许涂于涂于第二格内混匀

④轻摇玻片，经1-2分钟后观察结果

⑵试管凝集

①取小试管7支编号

②用5ml吸管吸取生理盐水于每管各加0.5ml

③用1ml吸管吸取溶血素0.5ml加入试管中反复吹吸三次使之与盐水混匀，吸出0.5ml注入第2管，以此类推稀释至第6管，自第6管吸出0.5ml弃去。第7管不加血清作对照。

④各管加绵羊红细胞0.5ml混匀，置37℃水浴中3小时后观察结果

⑶间接凝集抑制试验

①用毛细管滴加一滴被检材料于玻璃反应板的一个方格内，再滴加一滴生理盐水于另一个方格内作为对照

②各加一滴免疫血清，轻轻摇动，充分混匀

③再各加一滴致敏乳胶颗粒，缓缓摇动3-5分钟，在较强光线下观察结果

⑷ELISA

①包被聚乙烯塑料板，放4℃24小时

②弃掉包被液，用PBS洗涤3次，甩干后按图加入患者血清，阳性和阴性对照血清及PBS，放室温吸附1小时

③用PBS洗涤3次后甩干，加入酶标抗体，放37℃温箱45分钟

④用PBS洗涤3次后甩干，加入新配制底物邻苯二胺液，放37℃温箱15分钟